lunes, 13 de abril de 2009

rencuentro de eritrocitos º4

Recuento de eritrocitos: ejemplo

Observe que en la grilla de la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul. Ten en cuenta que la grilla central tiene 25 cuadrados de 1mm x 1mm de área y 0.10 mm de profundidad. El factor de dilución es por tanto de 1:200. Convierte el número de glóbulos rojos contados en 5 cuadrados a nº glóbulos rojos/µl. (1 µl (microlitro) = 1 mm3 )

Como se hace?


La imagen de abajo simula el campo que esta viendo al microscopio con un objetivo de 45x. Solo es visible el centro de la grilla. Intenta verificar esto al ir moviendo el campo de derecha-izquierda y de arriba-abajo, como si de una pletina de microscopio se tratase. Cuenta los glóbulos rojos en los cinco cuadrados mencionados anteriormente y determina el recuento de eritrocitos como se ha descrito anteriormente..

Muy importante: Cuando un eritrocito se sitúa en mitad de las líneas superior y/o de la izquierda, entonces es contabilizado. Pero no se contabiliza cuando se sitúa en mitad de las líneas inferior y/o de la derecha..


El rango normal de recuento de glóbulos rojos es el siguiente:

Mujeres:

3.9-5.6 millones/µl

Hombres:

4.5-6.5 millones/µl

Determine el recuento del sujeto cuya muestra aparece en la imagen.

Cual es la solucion




Técnicas de estudio de líneas celulares

TÉCNICAS DE CONTAJE CELULAR

Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.

Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos (cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter.

cprin.gif (14896 bytes)

El principio del contador celular se basa en la medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio. Como se puede ver en el esquema, una pequeña abertura entre los electrodos es la zona sensible a través de la que pasan las partículas que se encuentran en suspensión. Cuando una partícula atraviesa el orificio desplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. controlando la cantidad de la suspensión que circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas. Es posible contar y medir varios miles de partículas por segundo, independientemente de su forma, color y densidad.

En la unidad de Citometría de flujo y Microscopia Confocal de los Servicios Científico-Técnicos de la Universidad de Barcelona se dispone de contadores celulares.

Sin embargo, es posible determinar la densidad celular empleando métodos más sencillos. Nos basta con una cámara de contaje celular, por ej. la cámara de Neubauer, y un microscopio. Una cámara de contaje celular es un dispositivo en el que se coloca una muestra de la suspensión a medir. El dispositivo presenta unas señales que determinan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo el microscopio el número de partículas presentes en ese volumen se puede determinar la densidad de partículas en la suspensión de origen.




neubauer.jpg (27706 bytes)

La cámara de Neubauer es una cámara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separación entre dos lineas consecutivas de 0.25 mm. Así pues el área sombreada y marcada L corresponde a 1 milimetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 milímetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.

Si contamos las cuatro áreas sombreada (L) observando un total de x células entre las cuatro áreas, la concentración en la suspensión celular será :

concentración en la suspensión (células / mL) = 10000 (x/4)

En la imagen puedes observar el aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrícula de 16 pequeños cuadrados de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases.





Técnicas de estudio de líneas celulares

TÉCNICAS DE CONTAJE CELULAR

Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.

Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos (cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter.

cprin.gif (14896 bytes)

El principio del contador celular se basa en la medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio. Como se puede ver en el esquema, una pequeña abertura entre los electrodos es la zona sensible a través de la que pasan las partículas que se encuentran en suspensión. Cuando una partícula atraviesa el orificio desplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. controlando la cantidad de la suspensión que circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas. Es posible contar y medir varios miles de partículas por segundo, independientemente de su forma, color y densidad.

En la unidad de Citometría de flujo y Microscopia Confocal de los Servicios Científico-Técnicos de la Universidad de Barcelona se dispone de contadores celulares.

Sin embargo, es posible determinar la densidad celular empleando métodos más sencillos. Nos basta con una cámara de contaje celular, por ej. la cámara de Neubauer, y un microscopio. Una cámara de contaje celular es un dispositivo en el que se coloca una muestra de la suspensión a medir. El dispositivo presenta unas señales que determinan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo el microscopio el número de partículas presentes en ese volumen se puede determinar la densidad de partículas en la suspensión de origen.

neubauer.jpg (27706 bytes)

La cámara de Neubauer es una cámara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separación entre dos lineas consecutivas de 0.25 mm. Así pues el área sombreada y marcada L corresponde a 1 milimetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 milímetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.

Si contamos las cuatro áreas sombreada (L) observando un total de x células entre las cuatro áreas, la concentración en la suspensión celular será :

concentración en la suspensión (células / mL) = 10000 (x/4)


En la imagen puedes observar el aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrícula de 16 pequeños cuadrados de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases.


Existen numerosos modelos de cámaras de contaje celular adaptadas a su uso en microscopía. En la imagen puedes observar una cámara de Neubauer doble, como las que usas en el laboratorio de prácticas.

Para determinar la viabilidad celular se emplean diferentes métodos. El más común es el de tinción con azul tripán. El azul tripán es un coloide que se introduce en el interior de las células que presentan roturas en la membrana. Así pues las células que aparecen en la imagen, claramente de color azul, son consideradas no viables. Asimilar células blancas, por exclusión, a células viables es un error pues por este método se sobrevalora la viabilidad de las células en la suspensión, determinando como inviables sólo aquellas con la membrana rota. Existen otros métodos de determinación de la viabilidad celular como el más preciso de la tinción con ioduro de propidio

En la red dispones de descripciones detalladas sobre como utilizar un hemocitómetro, como la propuesta por P.J. Hansen, o la detallada descripción que aporta Beckton-Dickinson, y los problemas de cálculo de parámetros celulares que plantea empleando datos obtenidos a partir de un hemocitómetro, y otros protocolos para el contaje de células (en protocol-online)

- arriba -


Material docente diseñado y elaborado por Manuel Reina. Última actualización : 20/10/2003 10:25. Comentarios : mreina@ub.edu

se aseptiza el dedo con alcohol y luego se seca al aire o con algodón. Se coge entre el pulgar y el índice y se hace una punción rápida y penetrante a través de la piel de la punta del dedo con una lanceta estéril.





2. Se deshecha la primera gota de sangre y se aspira la siguiente con la pipeta de dilución perfectamente limpia y seca hasta la señal 1 o 0.5 (también puede utilizarse la pipeta de hemoglobina, de 20 microlitros). Hay que evitar la entrada de burbujas de aire, pudiendo ayudarnos de un papel de filtro para conseguir el enrasado.

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_02.jpg

3. A continuación se toma con la pipeta líquido de Hayem, isotónico con la sangre, hasta la señal 1; así, la sangre queda diluida al 1/10, si tomamos sangre hasta la señal 1, o al 1/20 si tomamos hasta 0.5. Esto es así porque el volumen de la bola de la pipeta es 100 veces superior al del capilar de la misma. (Si hemos utilizado la pipeta de hemoglobina podemos diluir su contenido en 2 o 4 ml de líquido de Hayem para obtener diluciones 1/100 o 1/200).

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_03.jpg

4. Tomamos la pipeta (o el tubo de ensayo) entre los dedos índice y pulgar y agitamos. A través de la goma de conexión con la pipeta, soplamos para despreciar las primeras gotas por corresponder al líquido que estaba en el capilar.

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_04.jpg

5. Se adapta un cubreobjetos sobre una cámara cuentaglóbulos limpia y seca y se coloca una gota en uno de los lados del cubre; esta gota penetra por capilaridad y rellena el retículo de la misma.

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_04.jpg

6. Una vez preparada la cámara se coloca sobre la platina del microscopio dejándose unos minutos en reposo para que sedimenten los glóbulos. Disponemos el condensador bajo y luz débil; enfocamos primero con el objetivo débil seco y luego se cambia al fuerte seco para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículo marcado en color rojo. Finalizado el recuento se procede a la limpieza de la pipeta con acético 1:3, agua destilada y alcohol-éter sucesivamente.

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_06.jpg

7.El volumen de sangre en el cual se han contado las células resulta de multiplicar la profundidad de la cámara por el factor de dilución, la superficie de los cuadrados y el número de cuadrados contados.

Con cámara de NEUBAUER: Superficie de 1 cuadrado grande (1/20 mm de lado):

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/redcel1.gif

Volumen de un cuadrado grande (1/10 mm de profundidad):

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/redcel2.gif

Si contamos "a" glóbulos rojos en "n" cuadrados pequeños, el número de glóbulos por cuadrado será a/n.

Si en un volumen 1/4000 mm3 hay a/n glóbulos rojos, en 1 mm3 habrá X. Luego:

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/redcel3.gif

siendo X el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre diluida.

Si la sangre se diluyó a 1/100 o 1/200, habrá que multiplicar el valor X por 100 o 200 respectivamente, con lo cual obtendremos un nuevo valor, Y, que representa el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre (sin diluir).

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/redcel4.gif



Se utilizan para calcular, mediante el uso del microscopio, el número de partículas (leucocitos, hematíes, bacterias…) por unidad de voluimen de un líquido.

La cámara está constituida por una placa base de vidrio especial pareciso a un porta, su parte central se encuentra separada de los extremos por unas ranuras. en ella se encuentran las cuadrículas de recuento.

La fórmula de contaje es: partículas/mm3= partículas contadas.

Clases de cámaras:

- Neubauer improved: Es el más utilizado (9 cuadros grandes, cada 1 de 1 mm2.)

- Neubauer: La diferencia es el cuadro grande central.

- Thoma: Se utiliza solo para el recuento de eritrocitos.

- Fuchs-Rosenthal: Se utiliza habitualmente para recuento de células en líquidos orgánicos (LCR, Líquido sinovial…)








CELULA PRESENTADAS EN EL REPOLLO ,TOMATEY CAMARA DE NEUBAVER

Células presentes en el repollo

Los cloroplastos son organeros celulares que en los organismos eucariontes fotosintetizadotes se encargan de la fotosíntesis específicamente se usa para designar a los platos verdes, algas verdes en las plantas

Células presentes en el tomate

Los cromosomas son un tipo de platos organuelos propios de la célula vegetal, que contienen los picmetos a los que se deben los colores, anaranjados rojos o frutos:

Cundo son rojos se denominan rodó platos cristalazos los pigmentos se depositan como cristaloides .:los pigmentos se depositan como la membranas ,tomate zanahoria

Funciones de la cámara de niubaver

Es un instrumento utilizado en cultivos celulares para realizar conteos de células en un medio de cultivo, consta de dos placas de vidrio, entre los cuales el volumen de liquido.

Una de las placas poseeuna grilla de dimensiones conocidas y que es visible al microscopio óptico.




1ºPRACTICA DE LABORATORIO ENFOCARLO CEBOLLA,TOMATEY LECHUGA






Practica de uso y manejo de microscopio





PRACTICA DE LABORATORIO







Datos;

Nombre del alumno; soto olmos jhoana

Nombre del profesor; víctor Manuel Alfaro López

Materia; ooperarequipo de laboratorio

Grupo; 2LM

Escuela; CBTIS

Trabajo; utilizar el microscopio

Fecha; 23 de marzo del 2009



Objetivo de la práctica

Para poder aprender a usar y manejar adecuadamente el microcopio, aplicando destreza en las diferentes áreas del laboratorio.

El objetivo de la práctica es enfocar los diferentes objetos del microscopio haciéndolo de la forma más rápida y sencilla.

También para reconocer el material de laboratorio y compórtanos bien en una practica de laboratorio.

Procedimiento:

Se coloca la cámara de neubaver en la platina y se comienza a mover las pinzas para la platina y los tornillos hasta conseguir un perfecto enfoque

Material:

Microscopio óptico

Porta objetos

Cámara neubaver

Cebolla

Tomate

Repollo





Índice

Portada…1 Pág.

Contra portada: 2 Pág.

Objetivo...3 Pág.

Introducción…-4 Pág.

Marco teórico…5, 6,7 Pág.

Conclusión.:.8 Pág.

Tiempo de la practica…9 Pág.



INTRODUCCION

En esta práctica logramos enfocar unas muestras de vegetal y poder observar como se enfoca y se mira las pequeñas formas que tienen.

También logramos tener un buen manejo del microscopio como esta formado y como utilizarlo para no dañarlo y cuidar sus partes frágiles.

Marco teórico

En la practica realizamos enfoques de 10x/0.25 del objetivo para mirar el vegetal que se esta observando

Elº1 enfoque que realizamos que realizamos en la cebolla tardamos para encontrar el enfoque de la cebolla 10 min. Máx.

Cuando se esta observando la cebolla en el microscopio se mira burbujas blancas gelatinosas encimadas, forma de estrías color transparente cada uno observo y enfoco la muestra de cebolla.

Marco teórico

En la practica realizamos enfoques de 10x/0.25 del objetivo para mirar el vegetal que se esta observando

Elº1 enfoque que realizamos que realizamos en la cebolla tardamos para encontrar el enfoque de la cebolla 10 min. Máx.

Cuando se esta observando la cebolla en el microscopio se mira burbujas blancas gelatinosas encimadas, forma de estrías color transparente cada uno observo y enfoco la muestra de cebolla.

Forma de la cebolla

Estriada y transparente

TOMATE

EN EL TOMETE FUE EL MISMO ENFOQUE QUE EN EL DE LA CEBOLLA SE USO EL OBJETIBO 10X.25 SE OBSEVO EL TOMATE EN EL MICROSCOPIO ENCIMA DEL PORTA OBJETOS

EN EL TOMATE SE OBSERVO…

ES DE COLOR ROJOP

FORMA JELATINOSA

RELLENA DE AGUA

TODAS JUNTAS

Tiempo en enfocar el microscopio 8 min.






EN EL REPOLLOSE OBSERVA LA FORMA GELATINOSA REDONDA MUCHAS BOLITAS DE COLOS VERDE COMO SI SE TUVIERA OBSERVANDO UNA MOLECULA EN PORCIONES PEQUEÑAS

EL REPOLLO SE ENFOCA EN 7 MIN EN EL OBJETIVO 10X/0.25




















CONCLUCION

CON TODOS LOS PASOS A SEGUIR EN EL MANEJO DEL MICROSCOPIO APRENDIA A MANEJAR Y A ENFOCAR EL MICROSCOPIO CON ALGUNOS PEDASOS DE TOMATE, CEBOLLA Y REPOLLO LAS FORMAS QUE TIENEN CADA VEGETAL COMO DE QUE COLOR SON Y COMO SE OBSERVAN, ENFOCAR EN EL PORTA OBJETOS Y ENFOCARLO O 10X/0.25DEL OBJETIBO

TIEMPO DE LA PRÁCTICA

PORTAR EQUIPO DE BIOSEGURIDAD=15MIN

ENFOQUE DEL MICROSCOPIO=30MIN

ENFOQUE DE CADA PERSONA=6 MIN CON 20 SEG

ENFOQUE DE LA CEBOLLA=10 MIN

ENFOQUE DEL TOMATE=8 MIN

ENFOQUE DEL REPOLLO=6 MIN

TOTAL DE TYEMPO 1 HORA CON 25 MIN

BIBLOGRAFIA:

ACTIVIDAD APUNTES DE LAB Y OBSERVACIONES


















domingo, 12 de abril de 2009

º2 PARCIAL MOLECULAS INORGANICAS

MOLECULAS LNORGANICAS

Están formados por distintos elementos pero en su componente principal no

Siempre es el carbono, siendo el agua el más importante.

FORMACIÓN DE COMPUETOS INORGANICOS

Se forman de manera ordinaria por la acción de distintas, fuerzas fisiquas.

Y químicas.

También pueden clasifiquarse de la reacción de estas sustancias ara elegía solar, el agua, el oxigeno enlaces que forman los compuestos inorgánicos suelen ser iónicos o covalentes.

Ejemplos de compuestos inorgánicos;

El cloruro de sodio (NaCl)

El agua ( H2O)

EL AMONIACO DE CARBONO ( Co2)

Clasificación de moléculas que funcionan en el aguo es un alimento vital porque;

Es el principal componente del organismo

Es imprescindible para las enzimas que provoca y regulan las reacciones

El cloruro (Cl.) es necesario para la elaboración del acido clorhídrico del tejido gástrico

El sodio (Na) interviene en la regulación del alanceo hídrico favoreciendo la retención de agua

El potasio (K) actúa en el balanceo hídrico favoreciendo la eliminación de agua

El yodo (I) es necesario para que la glándula tiroides elabore la secreción hormonal que regula el metabolismo

El hiero (Fe) es imprescindible para la formación de la hemoglobina de los glóbulos rojos

El calcio (Ca) y fósforo (P) son los que constituyen la parte inorgánica de los huesos

El (CO2) ES FUNDAMENTAL PARA EL PROCESO DE LA FOTOCINTESIS

Las sales minerales son moléculas inorgánicas de fácil ionización en presencia de agua y que en los seres vivos aparecen tanto precipitados como disueltas.

Estas sales tienen función estructural y funciones de regulaciones de pH, de la presión osmótica y de reacciones bioquímicas, en las que intervienen iones específicos.

Sales minerales insolubles
Llevan a cabo diferentes funciones, como formar órganos esqueléticos, conchas, depósitos en algunas paredes celulares de las plantas etc.

Sales minerales disueltas
Forman parte de los sistemas tampón, llamados también amortiguadores de pH.

Sistema tampón: tiene como función mantener constante el pH del medio de los seres vivos, frente a pequeñas adiciones de sustancias ácidas o básicas. Un sistema tampón esta formado por un ácido débil (que actúa como dador de protones al medio y por eso se considera que es un almacén de protones) y una sal del mismo ácido que actúa como base, y por lo tanto capta protones del medio.
Sistema tampón inorgánicos:
-Sistema tampón bicarbonato
-sistema tampón fosfato.

FICHA BIBLIOGRAFICA
www.yahoo.com
www.wikipedia.com