lunes, 13 de abril de 2009












practica peso y medidas


PRACTICA DE PESO Y MEDIDAS



PRACTICA DE LABORATORIO






DATOS

Nombre de la alumna: soto olmos jhoana

Nombre del profesor: víctor Manuel Alfaro López

Materia: operar equipo de laboratorio

Grupo. 2lm

Escuela.: CBTIS 155

Trabajo: peso y medidas

Fecha: 30/marzo del 2009-04-13





OBJETIVO

Peso i medidas el objetivo de la practica es usar la regla de 3 para utilizar la balanza granataria.

Procedimiento

Primero se piden los materiales de laboratorio los que se van a utilizar en la práctica, después empezamos a pesarlos en la balanza granataria uno por uno, mas adelante.

En el vaso de precipitado se coloca una porción de azúcar para saber cuanto pesa y se le resta lo que peso el vaso de precipitado y en le cristalizador se coloca y se sigue el mismo procedimiento que el de la azúcar.

MATERIAL

1caja petry

2vaso de precipitado 150 ml

3º vidrio de reloj

4laminilla para rxn inmunológicas

5vaso de precipitado 50 ml

6pipeta rally manguera con boquilla

7probeta graduada

8espátula de mango de fierro

9pipeta volumétrica

10pipeta pasteur

11tubo de ensayo

12cristalizador

13medio de cultivo

14pipeta graduada de 1 ml




INDICE

PORTADA: 1PAG

CONTRA PORTADA: 2PAG

OBJETIVO: 3 PAG

INTRODOCCION: 4PAG

MARCO TEORICO: 5,6Y 7 PAG

CONCLUCION.8 PAG

TIEMPO DE PRÁCTICA: 9 PAG









INTRODUCCION

EN ESTAPRACTICA EL PESO Y MEDIDAS DEL MATERIAL DE LABORATORIO EN LA BALANZA GRANATARIA

SE UTILIZA;

LA REGLA DE 3 AL MULTIPLICAR DIVIDIR SUMAR Y RESTAR LOS PESOS DFE LA AZUCAR Y LA SAL Y DESPUES RESTALES LO QUE PESO EL RECIPIENTE EN EL QUE ESTE DEPOCITADO EL PRODUCTO SIEMPRE HAY QUE TENER CUIDADO CON EL MATERIAL DE LABORATORIO POR QUE ES MUY FRAGIL

Y CARO.

BITACORA

º La caja petri se coloca en la balanza granataria y pesa 71 gr.

El vaso precipitado de 150 ml se coloca en la balanza y se pesa 28 gr.

El vidrio de reloj se coloca en la balanza granataria y pesa 17.9 gr.

Lamina para rxn inmu7nologicas se coloca en la balanza se pesa

53.6 gr.

ºse coloca en la balanza granataria y se pesa 116gr

Pipeta de rally manguera con boquilla se coloca en la balanza granataria y pesa 7.3 gr.

Espátula con mango de fiero se coloca el la balanza granataria

Y pesa 415 gr.

Probeta graduada de 100 ml se coloca en la balanza granataria con cuidado pesa 145gr

Pipeta vulometrica se coloca en la balanza y se pesa 22.6 gr.

Pipeta graduada de 1 ml su peso es

3.4gr

Pipeta pasteur se coloca en la balanza y se pesa 5.6 gr.

Tubo de ensayo se coloca en la balanza granataria y pesa 8-6gr

cristalizador se coloca en la balanza granataria y pesa 55.4 gr.

PESO Y MEDIDAS DE AZUCAR Y SAL

VASO PRESIPITADO CON AZUCAR

PESO 53.1

CRISTALIZADOR CON SAL

PESO 36.7 GR

AGAR DE HIERRO

52 = 1000ML 52X85=4420

____________-

X = 85ML

CAJADE PETRI CAPACIDAD DE 19 ML

1000/4420= 4.42







CONCLUCION

EN ESTA PRACTICA APRENDIMOS A MEDIR Y PESARLOS MATERIALES DE LABORATORIO, TAMBIEN A CUIDAR EL MATERIAL DE LABORATORIO LOM MAS LOGICO ES APOYARNOS EN EQUIPO Y CADA QUIEN UTILIZE LA BALANZA GRANATARIA Y SEPAMOS UTILIZARLA.

TAMBIEN UTILIZAMOS AZUCAR Y SAL PARA PESARLOS

TIEMPO DE LA PRÁCTICA

PORTAR EQUIPO DE LABORATORIO., 10 MIN

COMENZAMOS ALAS: 8,45 MIN

PESAR Y MEDIR LOS MATERIALES; 1 HORS Y 5 MIN

DESPOJARNOS DEL EQUIPO DE BIOSEGURIDAD... 5 MIN

BIBLOGARFIA: ACTIVIDAD DE LABORATORIO Y OBSERVACIONES.











act. problemas del medio de cultivo

REALIZAR LOS SIG PROBLEMAS

1; anota el nombre del medio de cultivo que se facilita , contando los dato visibles en su etiqueta

Base de agar sangre

Datos;

Formula: gr por litros

Agar: 15.0

Cloruro de sodio: 5.0

Infusión de músculo cardiaco: 10.0

Peptona: 10.00

Registro:Nº0123R84ssn

Contenido neto: 450 gr

Lote Nº: 5957123

Caducidad: 05/02/07

Catalogo Nº: 1031-A

2; lee cuidadosamente las indicaciones que contienen el bote del medio de cultivo.

3: rehidratar el contenido en gr para 1000 ml del cual debera ocupar un porcentaje para rehidratar en 250 ml 175 mly 138 ml

1:

40gr= 1000 ml

_____________-- (40 gr) (250ml)

X = 250 ml __________________

1000 = 10 ml

2;

40 gr= looo ml (40gr) (175ml)

___________ __________-

1000 = 7 ml

X = 175 ml

3:

40 gr= 1000ml ( 40 gr) (138 ml)

____________ __________________

X = 138 ml 1000 = 5.52 ml

act.5 bacterias en medios de cultivo

BACTERIAS EN MEDIOS DE CULTIVO

“Bacterias que se desarrollan en medios de cultivo”

Cuando se desea cultivar bacterias, es necesario tomar en cuenta los componentes nutritivos, sales, humedad y las condiciones físicas como lo son el pit, la luz y la temperatura.

Una bacteria puede alterar el pit del medio de cultivo como el resultado de la degradación de sustancias, productos de la propia bacteria.

Por otro lado las bacterias en su conjunto presentan una respuesta variable del oxigeno libre clarificándose:

AEROBICOS;

BACTERIAS QUE CRECEN EN PRESENCIA DE OXIGENO.

ANAEROBICAS.bacterias que crecen en ausencia de oxigeno libre

Anaerobias; facultativas bacterias que crecen en presencia como en ausencia de oxigeno libre

AEROTOLERANTES: bacterias que pueden tolerar el oxigeno y crecen en su presencia aun cuando no lo utilizan

MICROAEROFILAS: bacterias que crecen en presencia de pequeñas cantidades de oxigeno libre.

CADA BACTERIA TIENE UNA TEMPERATURA OPTIMA DE CRECIMIENTO CLASIFICANDOSE EN LOS SIG. GRUPOS

PSICROSILIOS.desarrollan a oºc o menos su temperatura

MESOFILAS.crecen mejor dentro 25y 40º

TERMOFILOS, crecen mejor entre 50 y 75º

HOPERTERMOFILAS: crecen próximas a 100ºc

rencuentro de eritrocitos º4

Recuento de eritrocitos: ejemplo

Observe que en la grilla de la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul. Ten en cuenta que la grilla central tiene 25 cuadrados de 1mm x 1mm de área y 0.10 mm de profundidad. El factor de dilución es por tanto de 1:200. Convierte el número de glóbulos rojos contados en 5 cuadrados a nº glóbulos rojos/µl. (1 µl (microlitro) = 1 mm3 )

Como se hace?


La imagen de abajo simula el campo que esta viendo al microscopio con un objetivo de 45x. Solo es visible el centro de la grilla. Intenta verificar esto al ir moviendo el campo de derecha-izquierda y de arriba-abajo, como si de una pletina de microscopio se tratase. Cuenta los glóbulos rojos en los cinco cuadrados mencionados anteriormente y determina el recuento de eritrocitos como se ha descrito anteriormente..

Muy importante: Cuando un eritrocito se sitúa en mitad de las líneas superior y/o de la izquierda, entonces es contabilizado. Pero no se contabiliza cuando se sitúa en mitad de las líneas inferior y/o de la derecha..


El rango normal de recuento de glóbulos rojos es el siguiente:

Mujeres:

3.9-5.6 millones/µl

Hombres:

4.5-6.5 millones/µl

Determine el recuento del sujeto cuya muestra aparece en la imagen.

Cual es la solucion




Técnicas de estudio de líneas celulares

TÉCNICAS DE CONTAJE CELULAR

Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.

Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos (cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter.

cprin.gif (14896 bytes)

El principio del contador celular se basa en la medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio. Como se puede ver en el esquema, una pequeña abertura entre los electrodos es la zona sensible a través de la que pasan las partículas que se encuentran en suspensión. Cuando una partícula atraviesa el orificio desplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. controlando la cantidad de la suspensión que circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas. Es posible contar y medir varios miles de partículas por segundo, independientemente de su forma, color y densidad.

En la unidad de Citometría de flujo y Microscopia Confocal de los Servicios Científico-Técnicos de la Universidad de Barcelona se dispone de contadores celulares.

Sin embargo, es posible determinar la densidad celular empleando métodos más sencillos. Nos basta con una cámara de contaje celular, por ej. la cámara de Neubauer, y un microscopio. Una cámara de contaje celular es un dispositivo en el que se coloca una muestra de la suspensión a medir. El dispositivo presenta unas señales que determinan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo el microscopio el número de partículas presentes en ese volumen se puede determinar la densidad de partículas en la suspensión de origen.




neubauer.jpg (27706 bytes)

La cámara de Neubauer es una cámara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separación entre dos lineas consecutivas de 0.25 mm. Así pues el área sombreada y marcada L corresponde a 1 milimetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 milímetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.

Si contamos las cuatro áreas sombreada (L) observando un total de x células entre las cuatro áreas, la concentración en la suspensión celular será :

concentración en la suspensión (células / mL) = 10000 (x/4)

En la imagen puedes observar el aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrícula de 16 pequeños cuadrados de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases.





Técnicas de estudio de líneas celulares

TÉCNICAS DE CONTAJE CELULAR

Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.

Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos (cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter.

cprin.gif (14896 bytes)

El principio del contador celular se basa en la medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio. Como se puede ver en el esquema, una pequeña abertura entre los electrodos es la zona sensible a través de la que pasan las partículas que se encuentran en suspensión. Cuando una partícula atraviesa el orificio desplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. controlando la cantidad de la suspensión que circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas. Es posible contar y medir varios miles de partículas por segundo, independientemente de su forma, color y densidad.

En la unidad de Citometría de flujo y Microscopia Confocal de los Servicios Científico-Técnicos de la Universidad de Barcelona se dispone de contadores celulares.

Sin embargo, es posible determinar la densidad celular empleando métodos más sencillos. Nos basta con una cámara de contaje celular, por ej. la cámara de Neubauer, y un microscopio. Una cámara de contaje celular es un dispositivo en el que se coloca una muestra de la suspensión a medir. El dispositivo presenta unas señales que determinan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo el microscopio el número de partículas presentes en ese volumen se puede determinar la densidad de partículas en la suspensión de origen.

neubauer.jpg (27706 bytes)

La cámara de Neubauer es una cámara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separación entre dos lineas consecutivas de 0.25 mm. Así pues el área sombreada y marcada L corresponde a 1 milimetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 milímetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.

Si contamos las cuatro áreas sombreada (L) observando un total de x células entre las cuatro áreas, la concentración en la suspensión celular será :

concentración en la suspensión (células / mL) = 10000 (x/4)


En la imagen puedes observar el aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrícula de 16 pequeños cuadrados de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases.


Existen numerosos modelos de cámaras de contaje celular adaptadas a su uso en microscopía. En la imagen puedes observar una cámara de Neubauer doble, como las que usas en el laboratorio de prácticas.

Para determinar la viabilidad celular se emplean diferentes métodos. El más común es el de tinción con azul tripán. El azul tripán es un coloide que se introduce en el interior de las células que presentan roturas en la membrana. Así pues las células que aparecen en la imagen, claramente de color azul, son consideradas no viables. Asimilar células blancas, por exclusión, a células viables es un error pues por este método se sobrevalora la viabilidad de las células en la suspensión, determinando como inviables sólo aquellas con la membrana rota. Existen otros métodos de determinación de la viabilidad celular como el más preciso de la tinción con ioduro de propidio

En la red dispones de descripciones detalladas sobre como utilizar un hemocitómetro, como la propuesta por P.J. Hansen, o la detallada descripción que aporta Beckton-Dickinson, y los problemas de cálculo de parámetros celulares que plantea empleando datos obtenidos a partir de un hemocitómetro, y otros protocolos para el contaje de células (en protocol-online)

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Material docente diseñado y elaborado por Manuel Reina. Última actualización : 20/10/2003 10:25. Comentarios : mreina@ub.edu

se aseptiza el dedo con alcohol y luego se seca al aire o con algodón. Se coge entre el pulgar y el índice y se hace una punción rápida y penetrante a través de la piel de la punta del dedo con una lanceta estéril.





2. Se deshecha la primera gota de sangre y se aspira la siguiente con la pipeta de dilución perfectamente limpia y seca hasta la señal 1 o 0.5 (también puede utilizarse la pipeta de hemoglobina, de 20 microlitros). Hay que evitar la entrada de burbujas de aire, pudiendo ayudarnos de un papel de filtro para conseguir el enrasado.

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_02.jpg

3. A continuación se toma con la pipeta líquido de Hayem, isotónico con la sangre, hasta la señal 1; así, la sangre queda diluida al 1/10, si tomamos sangre hasta la señal 1, o al 1/20 si tomamos hasta 0.5. Esto es así porque el volumen de la bola de la pipeta es 100 veces superior al del capilar de la misma. (Si hemos utilizado la pipeta de hemoglobina podemos diluir su contenido en 2 o 4 ml de líquido de Hayem para obtener diluciones 1/100 o 1/200).

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_03.jpg

4. Tomamos la pipeta (o el tubo de ensayo) entre los dedos índice y pulgar y agitamos. A través de la goma de conexión con la pipeta, soplamos para despreciar las primeras gotas por corresponder al líquido que estaba en el capilar.

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_04.jpg

5. Se adapta un cubreobjetos sobre una cámara cuentaglóbulos limpia y seca y se coloca una gota en uno de los lados del cubre; esta gota penetra por capilaridad y rellena el retículo de la misma.

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_04.jpg

6. Una vez preparada la cámara se coloca sobre la platina del microscopio dejándose unos minutos en reposo para que sedimenten los glóbulos. Disponemos el condensador bajo y luz débil; enfocamos primero con el objetivo débil seco y luego se cambia al fuerte seco para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículo marcado en color rojo. Finalizado el recuento se procede a la limpieza de la pipeta con acético 1:3, agua destilada y alcohol-éter sucesivamente.

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/recuento_06.jpg

7.El volumen de sangre en el cual se han contado las células resulta de multiplicar la profundidad de la cámara por el factor de dilución, la superficie de los cuadrados y el número de cuadrados contados.

Con cámara de NEUBAUER: Superficie de 1 cuadrado grande (1/20 mm de lado):

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/redcel1.gif

Volumen de un cuadrado grande (1/10 mm de profundidad):

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/redcel2.gif

Si contamos "a" glóbulos rojos en "n" cuadrados pequeños, el número de glóbulos por cuadrado será a/n.

Si en un volumen 1/4000 mm3 hay a/n glóbulos rojos, en 1 mm3 habrá X. Luego:

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/redcel3.gif

siendo X el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre diluida.

Si la sangre se diluyó a 1/100 o 1/200, habrá que multiplicar el valor X por 100 o 200 respectivamente, con lo cual obtendremos un nuevo valor, Y, que representa el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre (sin diluir).

http://www.ugr.es/%7Ejhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/redcel4.gif



Se utilizan para calcular, mediante el uso del microscopio, el número de partículas (leucocitos, hematíes, bacterias…) por unidad de voluimen de un líquido.

La cámara está constituida por una placa base de vidrio especial pareciso a un porta, su parte central se encuentra separada de los extremos por unas ranuras. en ella se encuentran las cuadrículas de recuento.

La fórmula de contaje es: partículas/mm3= partículas contadas.

Clases de cámaras:

- Neubauer improved: Es el más utilizado (9 cuadros grandes, cada 1 de 1 mm2.)

- Neubauer: La diferencia es el cuadro grande central.

- Thoma: Se utiliza solo para el recuento de eritrocitos.

- Fuchs-Rosenthal: Se utiliza habitualmente para recuento de células en líquidos orgánicos (LCR, Líquido sinovial…)